除菌過濾器驗證

1.驗證法規

新版GMP附錄1 無菌藥品：

第四十一條過濾器應當盡可能不脫落纖維。嚴禁使用含石棉的過濾器。過濾器不得因與産品發生反應、釋放物質或吸附作用而對産品質量造成不利影響。

第七十五條非zui終滅菌産品的過濾除菌應當符合以下要求：

（四）過濾除菌工藝應當經過驗證，驗證中應當確定過濾一定量藥液所需時間及過濾器二側的壓力。任何明顯偏離正常時間或壓力的情況應當有記錄並進行調查，調查結果應當歸入批記錄。

（五）同一規格和型號的除菌過濾器使用時限應當經過驗證，一般不得超過一個工作日。

2.驗證內容

從法律的規定看，需要驗證的內容如下：

1）zui終滅菌制劑

需要驗證：兼容性，溶出物，吸附性，選做“物料的完整性數據生成”。

需要確認：無纖維脫落、潔淨度、生物安全性。

2）非zui終滅菌制劑

需要驗證：兼容性，溶出物，吸附性，細菌生存性，細菌挑戰，選做“物料的完整性數據生成”。

需要確認：無纖維脫落、潔淨度、生物安全性。

3.驗證方法

3.1 兼容性分析

先將濾膜或濾芯浸泡在藥液中，在達到總計接觸時間之後，檢測濾膜或濾芯浸泡前後的變化，檢測指標有：濾膜的完整性，水流速，重量，膜厚、濾芯的強度、外觀變化等物理參數。當變化率小于規定的指標時（目前尚無統一的標准，一般由濾芯廠家根據大量驗證結果確定），確認濾膜或濾芯的與藥液的兼容性。

3.2 溶出物分析

溶出物——Extractables，是指可以通過人工或超常規的力量（如溶劑、溫度、或時間）去除的一種化學物質。

析出物——Leachables，是指在儲存或正常使用條件下，可以從接觸表面遷移進入藥品或工藝流體的一種化學組分。

一般認爲析出物是溶出物的子集。

溶出物的分析方法有：NVR法、TOC法、RP-HPLC法等。

溶出物驗證的目的是證明濾芯在藥液中的溶出物屬于濾芯固有的物質，排除濾芯遭受外源汙染的可能性，並且證明這種溶出物是安全的。

濾芯的溶出物驗證需要濾芯本身通過如下驗證：

1）濾芯本身材質符合食品接觸級塑料要求或飲用水設備衛生標准。

2）濾芯通過生物安全性測試（USP<88>或中國藥典二部規定的異常毒性測試）。

3.3 吸附驗證

当药液的成分对其药效非常重要，而滤芯可能产生很强的吸附时需要做吸附驗證。一般由滤芯使用者自行完成。

部分過濾器對産品的吸附作用極小，或産品吸附對産品活性成分影響極小時，吸附評估僅需要産品與濾芯小規模接觸後，得到影響極小的結論，並不需要作出吸附曲線。

若經評估濾芯的吸附對産品影響很大，則需要建立預吸附飽和方案。

3.4 細菌生存性

細菌生存性试验是細菌挑戰的前提，其目的是寻找細菌挑戰可能的验证方案。根据生存性结果的不同，将料液和工艺定性为杀菌、中度杀菌、或非杀菌。与料液接触工艺时间后，细菌logTr <1（死亡率<90％）的产品属于非杀菌性产品；与料液接触60min内，细菌logTr >1 （死亡率>90%）的产品属于杀菌性产品；与料液接触60min内，细菌logTr <1（死亡率<90％），同时与料液接触工艺时间后，细菌logTr >1（死亡率>90%）的产品属于中度杀菌产品。

3.5 細菌挑戰

細菌挑戰适用于除菌过滤工艺验证。

除菌級過濾器是指能夠濾除所有微生物，下遊得到無菌無菌濾出液的過濾器。

除菌过滤工艺的物理检测手段是滤芯的完整性检测，生物指示剂为B. dimininuta，ATCC 19146，挑战水平不低于10⁷CFU/cm2。

根據生存性結果，殺菌性産品和非殺菌性産品的挑戰方式不同，非殺菌性産品直接接種細菌後挑戰，殺菌性産品需要在産品循環後沖洗，再清除産品殘留後再用替代液挑戰。

3.6 物料完整性數據生成

物料完整性數據生成不属于法律强制要求验证的内容，其验证目的是使用产品代替水作为润湿液，从而简化完整性测试的程序。该验证非常适合灭菌后滤芯的完整性检测和不能与水接触物料的完整性检测，但产品完整性数据生成的前提是产品是稳定的，挥发性适当的溶液，悬浊液、强挥发性溶液等无法进行相关验证。产品完整性数据生成的结果必须得到細菌挑戰的验证。